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雷萌生物科普ibidi小知識:您應(yīng)了解的實驗小常識~

date:2022-04-26 15:43:14

  1、ibidi 聚合物和玻璃蓋玻片的剛度/楊氏模量是多少?
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  ibidi 聚合物蓋玻片和玻璃蓋玻片的楊氏模量分別約為 1 GPa 和 70 GPa。
  
  注:楊氏模量(或彈性模量)描述了固體材料的拉伸彈性。 它本質(zhì)上是材料的剛度,或者換句話說,材料彎曲或拉伸的難易程度。
  
  2、是否可將ibidi Culture-Inserts/ibidi插件放置在預(yù)涂層的表面上?
 
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  一般來說,只要涂層干燥,ibidi Culture-Inserts/ibidi插件是可以放置在涂層表面上的。 請注意,插件不會粘在潮濕的表面上。
  
  有關(guān)更多信息,請關(guān)注我們公眾號,參閱為什么當移除 ibidi Culture-Insert/ibidi插件時細胞有時會從蓋玻片上脫落?(將在后續(xù)公眾號中推出)
  
  3、ibidi 聚合物蓋玻片通常會發(fā)生什么水平的氣體交換/滲透性? 它們真的允許氣體交換嗎?
  
  ibidi 聚合物蓋玻片確實允許氣體交換。 在 23°C 時,O2 的滲透性為 153 cm³/ (m² d bar),CO2 的滲透性為 474 cm³/ (m² d bar)。 這意味著在 1 bar 大氣壓下,每天 153 cm3 O2 可以穿透 1 m2 的 180 µm (+10/-5 µm) 厚聚合物薄膜。
  
  對于 ibidi Stage Top 孵化系統(tǒng)的缺氧實驗,我們建議使用帶有玻璃底部的蓋玻片 ibidi 載玻片,因為它們不透氣。
  
  4、細胞可以在 µ-Slide 18 Well - Flat 中培養(yǎng)多長時間?
  
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  由于 µ-Slide 18 Well-Flat 的開孔結(jié)構(gòu)和使用的物質(zhì)量少,蒸發(fā)率高。 因此,玻片僅推薦用于不超過 48 小時的短期檢測。
  
  5、是否可以在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔中進行獨立實驗?
  
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  不可以,因為 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔之間很有可能會發(fā)生交叉污染。 但是,可以在兩個主要孔中進行兩個獨立的實驗。
  
  6、在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 中,細胞能否穿過孔之間的屏障板?
  
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  能, 隨著時間的推移,運動細胞可能會在 µ-Slide 2 孔共培養(yǎng)中的屏障上移動或增殖,尤其是當它們以高融合度接種時。 為避免這種情況,在載玻片表面包被可能會有所幫助。
  
  7、µ-Slide III 3in1 可以通過 ibidi 流體剪切力系統(tǒng)進行控制嗎?
  
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  可以。 通過特殊設(shè)置,可以使用 ibidi 流體剪切力系統(tǒng)完全控制µ-Slide三合一通道培養(yǎng)載玻片。 以這種方式,可以使用層流將載玻片中的貼壁細胞暴露于交替梯度。 如需了解更多信息請聯(lián)系我們獲得技術(shù)支持。
  
  8、如何防止培養(yǎng)液蒸發(fā)?
  
  根據(jù)孵化條件,少量培養(yǎng)基會迅速蒸發(fā),尤其是在長期實驗期間。 此外,所有細胞培養(yǎng)箱都需要很長時間才能恢復(fù)濕度,尤其是在打開門之后。 雖然溫度和二氧化碳在幾分鐘內(nèi)恢復(fù),但完全恢復(fù)濕度可能需要幾個小時。
  
  由于這些問題,我們建議使用以下技術(shù)之一來最大程度地減少蒸發(fā):
  
  ?將細胞培養(yǎng)容器放入裝有濕紙巾的培養(yǎng)皿中。
  
  ?用封口膜密封培養(yǎng)容器。
  
  ?使用 ibidi 防蒸發(fā)油(例如硅油)。
  
  詳細的應(yīng)用說明可參見細胞共培養(yǎng)的全新實驗方案
  
  9、我的 µ-Slides/µ-Dishes 底部有劃痕。 這些是從哪里來的,我該如何預(yù)防?
 
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  ibidi 聚合物蓋玻片對機械刮擦很敏感。 如果在將 ibidi µ-Slide/µ-Dish 直接放在工作臺上或培養(yǎng)箱內(nèi)時不加倍小心,它可能會受到損害。 因此,在顯微鏡下可能會看到小劃痕。 為避免這種影響,我們建議使用µ-Slide Rack或µ-Dish Rack等保護底部材料。 該解決方案還允許同時方便地處理多達8個µ-Slide或6個µ-Dish。
  
  10、如何最小化µ-Plate 24 孔中的彎液面?
  
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  彎液面的形成是小型開放孔的固有特性,無法完全避免。
  
  與疏水表面相比,彎液面更容易在親水表面上形成。由于大多數(shù)貼壁細胞類型不能很好地附著在疏水表面上,ibidi 提供具有親水、組織培養(yǎng)處理表面和最佳細胞粘附特性的培養(yǎng)容器 ( µ-Plate 24 孔黑色 ID 14 mm ibiTreat,#82426)。然而,在這種情況下,彎液面的形成可能比使用未涂層板時更突出。
  
  為了減少彎液面的形成,請嘗試使用具有未經(jīng)處理的疏水表面的 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic (#82421)。當充滿水時,該表面幾乎不會形成彎液面。然而,細胞培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)會附著在孔的表面。一段時間后,這將形成非共價單分子涂層,形成親水表面和突出的彎月面。水和緩沖液都不能洗掉蛋白質(zhì)涂層。
  
  為了盡量減少成像過程中的半月板問題并確保細胞附著,您可以在 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic 中嘗試以下方案:
  
  ? 用結(jié)合蛋白(例如聚-L-賴氨酸或纖連蛋白)包被孔以支持細胞附著。使用盡可能小的體積以確保只有孔的下部是親水的(例如,0.5–0.8 ml)。小心處理板,使孔的上部不與蛋白質(zhì)溶液接觸。涂敷后,小心地除去溶液。
  
  ? 將細胞接種到 0.5–0.8 ml 培養(yǎng)基中。定期檢查,至少每天一次,看看這個量是否足以確保您的細胞存活。如有必要,更換培養(yǎng)基,不要讓孔的上部“濕”。
  
  ? 成像時,用 1.5–2 ml 無蛋白質(zhì)溶液或緩沖液替換培養(yǎng)基。現(xiàn)在,第一步的親水涂層應(yīng)該低于您的填充水平,并且由于孔上部的疏水性,應(yīng)該只會形成最小的彎液面。

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